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技術(shù)文章 / article
胎牛血清如何規(guī)范化溶解
2017-07-05 瀏覽次數(shù)：1865
胎牛血清加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究，培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。
胎牛血清經(jīng)過正確處理的熱滅活血清，對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或*沒有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
1、胎牛血清說明
1）將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱12-24小時(shí)左右使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
2）切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來的血清直接放在水浴中，無論室溫的水或者37℃的水，因?yàn)樵谒≈醒逖杆偃刍艽蟮臏夭睿?20℃到37℃，溫差為57℃）極其容易造成血清產(chǎn)生沉淀。
3）直接放65℃水浴中更是極其殘忍的做法，是對血清的褻玩，對科學(xué)規(guī)則的粗暴踐踏！
4）血清應(yīng)該在-10℃以下保存。若一次無法用完一瓶，應(yīng)該無菌分裝，再冷凍保存。
2.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理？
1)若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起培養(yǎng)。
2）我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。
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