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凍存細胞時，有必要緩凍嗎？

2022-03-11 瀏覽次數(shù)：2065

一、我們先來說說何為緩凍：

緩凍即為凍存細胞時，要程序降溫——4℃ 30min，-20℃ 1h ，-80℃ 過夜，次日投入液氮內(nèi)。

二、那為什么要進行緩凍呢？

其實所謂的緩凍是一般使用傳統(tǒng)凍存液凍存過程中需要程序降溫。

傳統(tǒng)的凍存液，一般由胎牛血清、DMSO及基礎(chǔ)培養(yǎng)基等組分組成。凍存保護的DMSO組分，在進入細胞后結(jié)合細胞內(nèi)部的水份，降低冰點，防止細胞在冷凍過程中形成冰晶對細胞造成損害。

但是DMSO只能在細胞內(nèi)部保護細胞，細胞外部沒有保護，水結(jié)冰晶會在細胞膜外部受到損傷，為了防止冰晶過大，使用時必須采用程序降溫的方式，才可保證細胞復(fù)蘇的成功率（80%以上）。

若不采用程序降溫的形式，有些凍存的細胞，甚至復(fù)蘇成功率為0。

三、無血清細胞凍存液幫您輕松凍細胞！

無血清細胞凍存液，為多種保護劑組合，在細胞內(nèi)外進行雙重保護，大大提高了細胞復(fù)蘇存活率。無血清細胞凍存液，含多種保護劑成分。

一些保護劑，易于穿透細胞，避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞，同時另一些保護劑不能穿透細胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結(jié)合細胞外的水分子，降低細胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進入細胞的數(shù)量，HAKATA無血清細胞凍存液，為多種保護劑組合，在細胞內(nèi)外進行雙重保護，大大提高了細胞復(fù)蘇存活率。