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動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理

2022-11-14 瀏覽次數(shù):1168

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指細(xì)胞在體外條件下的生長(zhǎng),動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中不再形成組織。 從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。


用途

指動(dòng)物、(包括哺乳動(dòng)物、昆蟲(chóng)、魚(yú)類(lèi)、禽類(lèi)等)細(xì)胞在體外的培養(yǎng)技術(shù),即在無(wú)菌條件下,從機(jī)體中取出組織或細(xì)胞,模擬體內(nèi)正常生理狀態(tài)下生存的基本條件,讓它在培養(yǎng)器皿中繼續(xù)生存、生長(zhǎng)和繁殖的方法。體外培養(yǎng)的細(xì)胞可分為原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)給細(xì)胞生物學(xué)的研究帶來(lái)了極大的方便,解決了以人的活細(xì)胞材料作為研究對(duì)象或研究工具的問(wèn)題;并且可以通過(guò)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)一些在醫(yī)學(xué)上有重要診斷和治療價(jià)值的蛋白、病毒等產(chǎn)品。

過(guò)程

取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織。將材料剪碎,并用胰蛋白酶處理(消化),處理形成單個(gè)細(xì)胞,將單個(gè)的細(xì)胞放入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,成為細(xì)胞壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,出現(xiàn)接觸抑制。此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。另外,我們將培養(yǎng)10代以?xún)?nèi)的培養(yǎng)稱(chēng)為原代培養(yǎng)。10代以后的稱(chēng)為傳代培養(yǎng)。培養(yǎng)10~50代的細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞株。當(dāng)培養(yǎng)超過(guò)50代時(shí),大多數(shù)的細(xì)胞已經(jīng)衰老死亡,但仍有部分細(xì)胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變出現(xiàn)了無(wú)限傳代的特性,即癌變。此時(shí)的細(xì)胞被稱(chēng)為細(xì)胞系。

科研實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個(gè)重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如MBC?有適合各種細(xì)胞培養(yǎng)的血清,尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。

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